ICS 65.020.01 B 10 DB37 山 东 省 地 方 标 准 DB 37/ T 1897—2011 土壤硝态氮的测定 离子色谱法 Determination of Nitrate Nitrogen in Soil ——Ion Chromatography Method 2011 - 06 - 16 发布 山东省质量技术监督局 2011 - 08 - 01 实施 发 布 DB37/T 1897—2011 前 言 本文件按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由山东省农业标准化技术委员会提出并归口。 本标准起草单位：济南市农业质量检测中心。 本标准主要起草人：田相旭、张海洋、曹建涛、吕亮、袁青、常芳、于成广、姜斌、刘帅、张新颜。 I DB37/T 1897—2011 土壤硝态氮的测定 离子色谱法 1 范围 本标准规定了用离子色谱仪测定土壤中硝态氮的方法。 本标准适用于各类土壤中硝态氮的测定。 本方法检出限为0.1mg/kg（以氮计）。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 试样中硝态氮用氯化钙溶液振荡提取，净化柱净化，以氢氧化钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离， 电导检测器检测。以保留时间定性，外标法定量。 4 试剂 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水均为 GB/T 6682规定的一级水。 4.1 硝酸盐氮标准溶液（ρ（NO3 -N）=1000mg/L，水为基体）。 4.2 硝酸盐氮标准使用液：准确移取硝酸盐氮标准溶液（4.1）2.00mL 于 100mL 容量瓶中，用水定容 至刻度，此溶液中硝酸盐氮浓度为 ρ（NO3 -N）=20.00mg/L。 4.3 硝酸溶液：φ（HNO3）＝5%。 4.4 氢氧化钾淋洗液：c（KOH）＝4mol/L。 4.5 氯化钙浸提剂[c（CaCl2•6H2O）=0.01mol/L]:称取 2.2g 氯化钙（CaCl2•6H2O）溶于水中，稀释至 1 L。 5 仪器设备 5.1 离子色谱仪：包括电导检测器，配有阴离子抑制器，高容量阴离子交换柱，25 µL 定量环(或其他 合适容量的定量环)。 5.2 分析天平：感量 0.1g。 1 R II Ag 柱 （1.0 mL）或者同等性能的其它过滤柱。使用前用 10mL 水通过， 5.3 净化柱：On Guard○ 静置活化 30min。 5.4 注射器：1mL。 5.5 离心机：转速不低于 5000r/min，配有 50mL 离心管。 1 DB37/T 1897—2011 R II Ag柱是DIONEX公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便这一标准的使用者，并不表示对 注：On Guard○ 该产品的认可，如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。 5.6 5.7 5.8 水浴振荡器：满足 180±20r/min 的振荡频率或达到相同效果。 水性滤膜针头滤器：0.22µm。 三角瓶：500mL。 所有玻璃器皿使用前均需用φ(HNO3)＝5%的硝酸（4.3）浸泡4h，然后用水浸泡去硝酸，再用水冲洗 （3～5）次，晾干备用。 6 分析步骤 6.1 提取 称取新鲜土壤样品50g（精确到0.1g）于500mL的三角瓶中，加入250.0mL 0.01 mol/L氯化钙浸提液， 塞紧瓶塞，摇匀，在水浴振荡器上于（20～25）℃振荡30min（振荡频率：180±20 r/min）后，静置10 min。 6.2 净化 取6.1上清液用干滤纸过滤于干燥的三角瓶中，取大约30mL滤液移入50mL离心管中，以5000r/min 以上转速离心10min。取离心液过0.22µm滤膜，弃去前面3mL，收集剩余滤液，过On Guard○ R II Ag柱后 直接上机测定。 6.3 仪器参考条件 6.3.1 色谱柱：氢氧化物选择性，可兼容梯度洗脱的高容量阴离子交换柱，如 Dionex IonPac AS19 4mm 2） ×250mm(带 IonPac AS19 型保护柱 4mm×250mm) ，或性能相当的离子色谱柱。 6.3.2 淋洗液：氢氧化钾溶液，浓度为 5mmol/L 和 32mmol/L。梯度洗脱：5mmol/L 5min，32 mmol/L 20 min，5mmol/L 5min。 6.3.3 抑制器：连续自动再生膜阴离子抑制器，或等效抑制装置。 6.3.4 检测器：电导检测器，检测池温度 30℃。 6.3.5 淋洗液流速：1.0mL/min。 6.3.6 进样体积：25µL（可根据样品浸提液中硝态氮的含量进行调整）。 6.4 测定 6.4.1 标准曲线 - 准确移取硝酸盐氮（NO3 -N）标准使用液（4.2）0.00mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL、7.50mL、10.00 mL于10mL容量瓶中，用水稀释至刻度，得到含硝酸盐氮（NO3 -N）浓度系列为：0.00mg/L 、2.00mg/L 、 5.00mg/L、10.00mg/L 、15.00mg/L 、20.00mg/L的标准溶液。依次进样，得到上述各浓度标准溶液的 色谱图。以硝酸盐氮（NO3 -N）的浓度（mg/L）为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，并计算 线性回归方程。 6.4.2 样品测定 注：给出这一信息是为了方便本标准的使用者,并不表示对该产品的认可,如果其他等效产品具有相同的效果,则可 使用这些等效的产品。 2 DB37/T 1897—2011 6.4.2.1 空白试验 除不加试样外，试剂用量和操作步骤与6.1～6.2相同。 6.4.2.2 试液测定 用1mL注射器分别吸取空白和试样溶液，在相同工作条件下，依次注入离子色谱仪中，以保留时间 定性，峰面积定量。 7 结果计算 - 试样中硝态氮（NO3 -N）的含量按公式（1）计算： X= (c − c0 ) × V × f ×1000 ……………………………………（1） m × 1000 式中： X —试样中硝态氮的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c —测定用试样溶液中的硝态氮浓度，单位为毫克每升(mg/L)； c 0—试剂空白溶液中的硝态氮浓度，单位为毫克每升(mg/L)； V —试样溶液体积，单位为毫升(mL)； m —试样取样量，单位为克（g）； f —试样溶液稀释倍数。 平行测定结果用算术平均值表示，保留小数点后一位数字。 8 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的相对相差≤5%。 3 DB37/T 1897—2011 AA 附 录 A （资料性附录） 土壤中硝态氮和常见无机阴离子色谱图 图A.1 土壤中硝态氮和常见无机阴离子色谱图 _________________________________ 4