ICS 65.020 B 662 45 4 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 CCS DBB45/T 238 82—2021 观 石斛杂杂交育 观赏石 育种技 技术规规程 CCode of practice p for crooss breed ding of ornament o tal Dendr robium 2021 - 11 - 27 发布 发 广西壮 壮族自治区 区市场监督 督管理局 2021 - 12 1 - 25 实施 实 发 布 — DB45/T 2382 2021 1 . 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由广西壮族自治区林业局提出、归口并宣贯。 本文件起草单位：广西壮族自治区林业科学研究院。 本文件主要起草人：龚建英、王华新、汪小玉、潘文、覃荣、龙定建、苏莉花、陈宝玲、唐遒冥、 石继清、孙利娜、唐庆、蒙芳、桂雪萍、吴玉华、李华娟、刘华。 II — DB45/T 2382 2021 观赏石斛杂交育种技术规程 1 范围 本文件规定了观赏石斛（Dendrobium）杂交育种的亲本选配及栽培、杂交技术、F1代无菌苗培育、 F1代观测及组合筛选、优良单株选择、优良单株扩繁、档案管理等内容。 本文件适用于广西境内的观赏石斛杂交育种。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 LY/T 2698 铁皮石斛杂交育种技术规范 NY/T 2758 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 石斛属 DB45/T 1783 石斛兰组培快繁技术规程 3 术语和定义 3.1 下列术语和定义适用于本文件。 唇瓣 labellum 3.2 由内轮花被片中央的一片变态而成，常有鲜艳的色泽和复杂的结构。 合蕊柱 column 3.3 雌雄蕊融合而成的柱状器官。 柱头窝 stigma nest 蕊柱柱头中间凹陷的器官。 4 亲本的选配与栽培 4.1 亲本选择 株形紧凑美观，花色艳丽、花期长、花量大，具有芳香，易栽培，抗逆性强，表型变异较大。 4.2 组合配制 父母本杂交亲和性高，母本观赏性、适应性以及繁殖力综合性状优良，父本单个性状突出，具有要 改良的目标性状。 1 — DB45/T 2382 2021 4.3 亲本栽培 亲本种植于具有隔离网的温室大棚内，方法参照LY/T 2698执行。 5 杂交技术 5.1 工具准备 采样瓶、采样针、牙签高温消毒处理，备用。 5.2 母本花朵 宜在母本的花朵开放 1 d～3 d 进行授粉。 5.3 父本花朵 宜在父本花朵开放1 d～5 d采集花粉。 5.4 花粉采集 用采样针或牙签去除父本植株药帽，取下花粉块，置于采样瓶内。 5.5 花粉保存 将装有花粉的干燥瓶密封，并在4 ℃冰箱保存，存放时间不宜超过7 d。 5.6 授粉方法 5.6.1 授粉时间 宜选择晴天上午9:00～10:30或下午16:30～17:30。 5.6.2 授粉操作 用沾水牙签去除母本植株唇瓣、药帽和花粉，去除父本药帽，取下父本花粉块或将采集瓶内保存的 父本花粉送至母本合蕊柱的柱头窝，轻压粘稳。 5.7 授粉花朵数 每植株授粉3～4朵。 5.8 标记 在授粉植株上挂标签，记录父母本、授粉人员和授粉日期等，参见附录A。 5.9 授粉后管理 授粉后停止浇水24 h，蒴果膨大后每假鳞茎保留果实1～2个。 5.10 蒴果采收与保存 5.10.1 采收时间 蒴果表皮由绿色转为黄色且尚未开裂时采收。 2 — DB45/T 2382 2021 5.10.2 测定和统计 测定蒴果长度、粗度和重量，记录蒴果形状和颜色，统计不同杂交组合座果率。 5.10.3 消毒和保存 用75％酒精拭擦蒴果表面，然后用0.1％氯化汞溶液消毒8 min～10 min，无菌水冲洗5次，晾干水分 后放置在4 ℃冰箱保存备用。 6 F1 代无菌苗培育 6.1 蒴果灭菌 用75％酒精消毒30 s，无菌水冲洗3次，再用0.2％氯化汞溶液消毒3 min～5 min，无菌水冲洗5次， 用消毒过的滤纸吸干水备用。 6.2 无菌播种 将消毒后蒴果置于无菌培养皿中，用消毒的解剖刀切开蒴果，将种子均匀分布于萌发培养基表面。 6.3 萌发培养基 参见附录B.1。 6.4 分化培养基 参见附录B.2。 6.5 壮苗生根培养基 参见附录B.3。 6.6 其它 无菌播种苗的培养条件、炼苗、移栽和移栽后管理，参照DB45/T 1783的规定执行。 7 F1 代观测及组合筛选 7.1 F1 代性状观测 参照NY/T 2758的规定执行。 7.2 组合筛选 根据育种目标进行综合评价筛选，评价指标见附录C。 8 优良单株选择 8.1 指标测定 参照NY/T 2758的规定执行。 3 — DB45/T 2382 2021 8.2 优良单株选择 按照7.2执行。 9 优良单株扩繁 参照DB45/T 1783执行。 10 档案管理 包括组合编号、父母本名称及编号、杂交授粉时间、无菌播种时间、移栽时间、第一次开花时间、 F1代数量、优株选择时间、入选优株编号等。 4 — DB45/T 2382 2021 A A 附 录 A （资料性） 观赏石斛组杂交授粉标签格式 观赏石斛杂交授粉标签格式见图A.1。 母本： 父本： 花朵编号： 授粉地点： 授粉人员： 授粉时间： 图A.1 观赏石斛杂交授粉标签格式 5 — DB45/T 2382 2021 B B 附 录 B （资料性） 无菌播种培养基配方 B.1 萌发培养基 25 /L /L 5.4 5.6。 MS+白糖 g +琼脂 mg ,pH ～ 4.7 g/L+活 性 炭 0.5 g/L+蛋白胨 1 g/L+椰汁 100 mL/L+6 ～ BA0.05 mg/L ～ 0.2 B.2 分化培养基 25 /L 4.7 /L 性 0.5 g/L+蛋白胨 1 g/L+马铃薯 100 g/L+6-BA0.05 mg/L ～ 0.2 /L NAA0.05 /L 0.2 /L 5.4 5.6。 g +活 炭 MS+白糖 g +琼脂 mg + mg ～ mg ,pH ～ B.3 生根壮苗培养基 1/2MS+白糖30 g/L+琼脂5.0 g/L+活性炭1.0 g/L+蛋白胨2 g/L+香蕉60 g/L+马铃薯40 g/L+6～BA0.05 mg/L～0.2 mg/L,pH 5.4～5.6。 6 DB45/T 2382—2021 附 录 C （资料性） ） 观赏石斛组合筛选选和优良单株 株选择主要评 评价指标 观赏赏石斛组合筛 筛选和优良单 单株选择主要要评价指标见表C.1。 表C.1 观赏赏石斛组合筛 筛选主要评价 价指标 C D 指标类别 植株 假鳞茎茎 观 花 赏 性 叶 抗逆性 适应性 繁殖力 株高 茎长 花型 株形 茎粗 花色 叶长 叶宽 抗寒 抗旱 成活率 生长势 新芽数 座果率 C 评价指标 评 株幅 株 形状 形 节间距距 颜色 / / / / / / 花梗 整齐 唇瓣 距长 花梗长 整 花径 花 花朵数数 花期长短 自然 花香 香 长 数 度 特性 花期 叶数 叶 叶形 叶艺 叶地 质 / / / / 抗虫 抗 / / 抗病 / / 耐湿热 耐晒 / / / / / / / / / / / / 7 中华人民共和国广西地方标准 观赏石斛杂交育种技术规程 DB 45/T 2382―2021 广西壮族自治区市场监督管理局统一印刷 版权专有 侵权必究