ICS 65.020.20 CCS B21 1303 秦 皇 岛 市 地 方 标 准 DB 1303/T 299—2021 葡萄一年两次育种技术规范 （报批稿） 2021 - 11 - 15 发布 2021 - 12 - 15 实施 秦皇岛市市场监督管理局 发 布 DB 1303/T 299—2021 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由秦皇岛市市场监督管理局提出并归口。 本文件起草单位：河北省农林科学院昌黎果树研究所负责起草。 本文件主要起草人：韩斌、郭紫娟、李敏敏、刘长江、尹勇刚、孙艳、贾楠、赵胜建、郭勇、赵利、 李璠、冯丽娜、田丹丹、王伟。 I DB 1303/T 299—2021 葡萄一年两次育种技术规范 1 范围 本文件规定了葡萄一年两次育种技术的杂交育种程序、杂交苗管理、杂交后代评价、区域试验与生 产试验、品种审定的技术要求。 本文件适用于秦皇岛市葡萄一年两次育种技术。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 NY/T 369 葡萄苗木 NY/T 2563 植物新品种特异性、一致性和稳定性测试指南 葡萄 DB13/T 5419 光系列葡萄设施栽培技术规程 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 一年两次育种 breeding twice a year 利用一年两熟栽培技术，选择易花芽分化、易二次结果的品种为母本，通过催芽、促花、保果、促 二次花等技术，实现一年两次育种，加速选育新品种。 3.2 绝后摘心 removal of new shoots and buds 在摘心的时候，将叶腋上包含夏芽和冬芽在内的所有芽点一起抹掉。 4 杂交育种程序 包括亲本的选择、花粉的采集、授粉、杂交果管理、杂交苗培育、杂交后代鉴定与评价及生产区域 性试验等过程，具体程序参见附录A。 5 杂交苗管理 5.1.1 亲本选择 根据育种目标的要求，确定易花芽分化、易二次结果的品种为母本，并考虑亲本间杂交亲和性。 5.1.2 花粉采集 2 DB 1303/T 299—2021 从父本品种的植株上，采集初开的花穗，将已开放的花去除，用镊子分离出未开放花的花药，经筛 子过滤后平铺在硫酸纸上，在25℃～28℃、相对湿度60%环境下，放置1 d～2 d，待花药散出花粉，收 集花粉，-80℃干燥贮存备用。 5.1.3 去雄 5.1.4 时期 在授粉前3 d～4 d套袋，避免花粉污染，在开花前2 d花蕾呈黄绿色时去雄。 5.1.5 方法 去雄前，工具用75%酒精消毒，使用镊子去除花瓣和雄蕊，此过程中注意勿损伤花柱头，去除花药 后，操作人员相互检查，最后清水冲洗花穗立即套袋。 5.2 授粉与套袋 在去雄后2 d～3 d，当柱头上开始分泌透明黏液时，可用毛笔或授粉器粘取花粉，将花粉点授于柱 头上。授粉后立即将纸袋套好，每花穗每天授粉1次，重复2次～3次。 5.3 一次杂交果管理 5.3.1 打破休眠 春季葡萄萌芽前用50%单氰胺25倍液涂抹结果母枝冬芽、节间和剪口。涂抹后即浇透水。土壤相对 湿度保持70%～80%，空气相对湿度保持在90%以上。保持温室内地温10℃以上，空气温度25℃～30℃,15 d左右开始萌芽，逐步增加光照，降低温室内空气湿度至60%左右。 5.3.2 促花保果 结果母枝选择粗度在0.8 cm左右枝条，选留1个结果枝，每结果枝留下1个花序，花前5 d～7 d花序 以上留4片～6片叶摘心，控制结果枝营养生长，促花、提高坐果率。坐果后的管理按照DB13/T 5419规 定执行。 5.4 二次杂交果管理 一次花授粉后顶端副梢留1片叶反复摘心，花序以上其它副梢绝后摘心。在一次花坐果后顶端副梢 停止摘心，促进新梢冬芽萌发形成二次花。二次花序以上4片叶摘心，控制新梢营养生长，叶片喷施氨 基酸肥和富含硼、锌等微量元素肥，促花、提高坐果率。 坐果后的管理按照DB13/T 5419规定执行。 5.5 土肥水管理 按照DB13/T 5419规定执行。 5.6 病虫害防控 按照DB13/T 5419规定执行。 5.7 果实采收与取种 3 DB 1303/T 299—2021 果实充分成熟时采收，取出种子。用清水将种子冲洗干净，再用25%多菌灵可湿性粉剂250倍药液浸 泡10 min杀菌。晾干后分组合装于纸袋内室温贮藏。纸袋上表明杂交组合名称和编号。 5.8 播种 5.8.1 沙藏处理 于12月中旬选背风阴凉处沟藏。沙藏前种子用清水浸泡1 d～2 d,再与湿沙混合。沙的湿度以手握 成团而不滴水，松手不散轻触散开为宜。种子和沙混合均匀，比例为1:5～1:8。在种子层积过程中，要 经常检查，后期要注意沙堆中湿度，如发现干燥或干湿不匀时，应适当补水或翻动。3月上旬，种子取 出播种。 5.8.2 催芽 将经过沙藏的种子，浸种24 h以上，去除种皮，用湿毛巾包裹放入人工气候箱中催芽，催芽环境设 定：温度25℃左右，相对湿度70%左右。在催芽3 d～5 d开始萌发。 5.8.3 温室播种 将萌发的种子挑出，用湿毛巾包裹并做好标记，在温室培养盘中播种，深度不超过5 mm。温室温度 控制在25℃左右，培养盘上覆盖蛭石保持湿度。插上标记牌。在培养7 d～10 d开始萌芽。 5.9 杂交苗管理 5.9.1 幼苗期管理 在幼苗期温度在25℃～30℃之间，保持培养盘的湿度。注意预防葡萄立枯病病害。 5.9.2 炼苗定植 在幼苗长到5片叶时炼苗，将幼苗移出温室，于阴凉通风处炼苗3 d左右，即可定植。 5.9.3 定植和培育 定植的株行距在0.2 m~ 0.8 m × 1.0 m~ 2.5 m范围，定植后注意及时引蔓上架，加强肥水管理。 5.9.4 肥水管理 按NY/T 369规定执行。 5.9.5 病虫害管理 按NY/T 369规定执行。 6 杂交后代评价 6.1 初选优系筛选 依据育种目标，筛选符合要求的单株。杂交苗田间定植后进行病虫害田间抗性评价，结果后第一、 二年评价鉴定果实经济性状、植物学性状和抗病性。选择优良单株进行生产区域性试验。 4 DB 1303/T 299—2021 6.2 果实经济学性状评价 按 NY/T 2563 规定执行。 7 区域试验与生产试验 7.1 区域试验 每个优系的区域试验在不同生态类型不少于 3 个试验点，试验时间不少于 2 个生产周期。 7.2 生产试验 每个优系的生产试验在同一生态类型区不少于 3 个试验点，每个试验点种植面积不少于 10 亩，试 验时间为 2 个生产周期。 8 品种审定 8.1 概述 通过对杂交优系经济学性状和植物学性状的细致观察，并经过区域试验和生产试验，从中筛选出符合育 种目标、综合性状最为优良的优系进行审定。 5 DB 1303/T 299—2021 A B A B 附 录 A （资料性） 图1 葡萄一年两次育种程序 6