(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210531845.8 (22)申请日 2022.05.17 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114622042 A (43)申请公布日 2022.06.14 (73)专利权人 北京肝病研究所 地址 100071 北京市丰台区右安门外西头 条8号 (72)发明人 陈德喜　马迎民　李家玺　贲海静　 王阳　魏飞力　乔录新　 (74)专利代理 机构 北京汲智翼成知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11381 专利代理师 陈曦　刘娟 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01)C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/93(2006.01) 审查员 李恩 (54)发明名称 检测新型冠状病毒联合呼吸道病毒的引物 探针组和检测试剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种检测新型冠状病毒联合 呼吸道病毒的引 物探针组， 包括SEQ  ID No.1至 SEQ ID No.34所示的引物 探针组。 本发明提出的 11种病毒联合检测试剂盒特异性强， 灵敏度高。 基于微流控技术实现微量样本， 一次采样鉴别新 冠病毒和多种呼吸道病毒， 并可以根据临床需 要， 实现高通 量检测。 权利要求书2页 说明书19页 序列表14页 附图6页 CN 114622042 B 2022.08.19 CN 114622042 B 1.一种检测新型 冠状病毒联合呼吸道病毒的引物探针组， 其特 征在于包括： 用于检测人副流感病毒1型PIV1的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.1和SEQ  ID No.2所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.3所示； 用于检测人副流感病毒2型PIV2的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.4和SEQ  ID No.5所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.6所示； 用于检测人副流感病毒3型PIV3的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.7和SEQ  ID No.8所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.9所示； 用于检测甲型流感病毒Inf ‑A的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.10和SEQ  ID No.11所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.12所示； 用于检测乙型流感病毒Inf ‑B的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.13和SEQ  ID No.14所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.15所示； 用于检测人类呼吸道合胞病毒A的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.16和SEQ  ID No.17所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.18所示； 用于检测人类呼吸道合胞病毒B的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.19和SEQ  ID No.20所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.21所示； 用于检测人类腺病毒7型AdV7的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.22和SEQ  ID No.23所 示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.24所示； 用于检测人类博卡病毒HBoV的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.25和SEQ  ID No.26所示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.27所示； 用于检测人类偏肺病毒hMPV的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.28和SEQ  ID No.29所示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.30所示； 用于检测新型冠状病毒SARS ‑CoV‑2的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.31和SEQ  ID  No.32所示， 探针核苷酸序列如SEQ  ID No.33和SEQ ID No.34所示。 2.如权利要求1所述的引物探针组， 其特 征在于： 所述检测 新型冠状病毒SARS ‑CoV‑2的探针SEQ  ID No.33的5 ’端标记FAM  荧光发生基 团， 3’端标记MGB； 所述探针SEQ  ID No.34的5’端标记VIC荧光发生基团， 3 ’端标记MGB。 3.如权利要求1所述的引物探针组， 其特 征在于： 所述探针SEQ  ID No.3、 探针SEQ  ID No.6、 探针SEQ  ID No.9、 探针SEQ  ID No.12、 探针 SEQ ID No.15、 探针SEQ  ID No.18、 探针SEQ  ID No.21、 探针SEQ  ID No.24、 探针SEQ  ID  No.27和探针SEQ  ID No.30的5’端标记FAM  荧光发生基团， 3 ’端标记MGB。 4.如权利要求1所述的引物探针组， 其特 征在于还 包括预扩增引物组， 序列如下 所述： 用于预扩增人副流感病毒1型PIV1的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.35和SEQ  ID No.36 所示； 用于预扩增人副流感病毒2型PIV2的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.37和SEQ  ID No.38 所示； 用于预扩增人副流感病毒3型PIV3的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.39和SEQ  ID No.40 所示； 用于预扩增甲型流感病毒Inf ‑A的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.41和SEQ  ID No.42所 示；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114622042 B 2用于预扩增乙型流感病毒Inf ‑B的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.43和SEQ  ID No.44所 示； 用于预扩增人类呼吸道合胞病毒A的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.45和SEQ  ID No.46 所示； 用于预扩增人类呼吸道合胞病毒B的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.47和SEQ  ID No.48 所示； 用于预扩增人类腺病毒7型AdV7的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.49和SEQ  ID No.50所 示； 用于预扩增人类博卡病毒HBoV的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.51和SEQ  ID No.52所 示； 用于预扩增人类偏肺病毒hMPV的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.53和SEQ  ID No.54所 示； 用于预扩增新型冠状病毒SARS ‑CoV‑2的引物核苷酸序列如SEQ  ID No.55和SEQ  ID  No.56所示。 5.权利要求1至4中任意一项所述的引物探针组在制备用于检测新型冠状病毒联合呼 吸道病毒的检测试剂盒中的用途。 6.如权利 要求5所述的用途， 其特征在于， 所述呼吸道病毒包括甲型流感病毒Inf ‑A、 乙 型流感病毒Inf ‑B、 人副流感病毒1型PIV1、 人副流感病毒2型PIV2、 人副流感病毒3型PIV3、 人类呼吸道合胞病毒A、 人类呼吸道合胞病毒B、 人类腺病毒7型AdV7、 人类博卡病毒HBoV和 人类偏肺病毒h MPV中的一种或多种。 7.一种用于检测新型冠状病毒联合呼吸道病毒的检测试剂盒， 其特征在于包括权利要 求1至4中任意 一项所述的引物探针组。 8.如权利要求7所述的试剂盒， 其特征在于还包括带有人副流感病毒1型PIV1、 人副流 感病毒2型PIV2、 人副流感病毒3型PIV3、 甲型流感病毒Inf ‑A、 乙型流感病毒Inf ‑B、 人类呼 吸道合胞病毒A、 人类呼吸道 合胞病毒B、 人类腺病毒 7型AdV7、 人类博卡病毒HBoV、 人类偏肺 病毒hMPV和新型 冠状病毒 核酸片段的重组质粒。 9.如权利要求8所述的试剂盒， 其特 征在于， 所述重组质粒中病毒的核酸序列为： 人副流感病毒1型PIV1  病毒核酸片段序列如SEQ  ID No.57所示； 人副流感病毒2型PIV 2 病毒核酸片段序列如SEQ  ID No.58所示； 人副流感病毒3型PIV3病毒 核酸片段序列如SEQ  ID No.59所示； 甲型流感病毒I nf‑A病毒核酸片段序列如SEQ  ID No.60所示； 乙型流感病毒I nf‑B病毒核酸片段序列如SEQ  ID No.61所示； 人类呼吸道合胞病毒A病毒 核酸片段序列如SEQ  ID No.62所示； 人类呼吸道合胞病毒B病毒 核酸片段序列如SEQ  ID No.63所示； 人类腺病毒7 型AdV7病毒 核酸片段序列如SEQ  ID No.64所示； 人类博卡病毒HBoV病毒 核酸片段序列如SEQ  ID No.65所示； 人类偏肺病毒h MPV病毒核酸片段序列如SEQ  ID No.66所示； 新型 冠状病毒 核酸片段序列如SEQ  ID No.67所示。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114622042 B 3