ICS 67.100.01 X 16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 2659-2014 牛乳脂肪、蛋白质、乳糖、总固体的 快速测定 红外光谱法 Rapid determination of fat,protein,lactose and total solids in milk- Infrared spectrometry (ISO 9622: 1999, Whole milk-Determination of milkfat,protein and lactose content-Guidance on the operation of mid-infrared instruments,NEQ) 行业标准信息服务平台 2014-10-17发布 2015-01-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T2659—2014 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准非等效采用ISO9622：1999《全脂牛乳一乳脂肪、蛋白质和乳糖含量测定一中红外仪操作指 南》(Whole milk-Determination of milkfat, protein and lactose content-Guidance on the operation of mid-infraredinstruments）。与ISO9622：1999相比主要区别如下： 删除原标准的红外测定仪的主要特征、采样、试样均匀性、检验报告等章节及附录A、附录B、 附录C; 增加试剂和仪器等章节； 一将影响测定准确度的因子和仪器校准等章节修改为本标准的附录A； 一将仪器短期稳定性的日检查修改为本标准的附录B。 本标准由农业部畜牧业司提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会（SAC/TC274)归口。 本标准起草单位：农业部乳品质量监督检验测试中心（哈尔滨）。 本标准主要起草人：李琴、巩军、姜金斗、徐萍、褚中秋、尹凤芝、陶大利、韩秋红、王迎俊。 行业标准信息服务平台 I NY/T2659—2014 牛乳脂肪、蛋白质、乳糖、总固体的快速测定 红外光谱法 1范围 本标准规定了牛乳中脂肪、蛋白质、乳糖、总固体的牛乳红外光谱仪快速测定方法。 本标准适用于牛乳中脂肪、蛋白质、乳糖、总固体的快速测定。 本标准各组分检出限为0.01g/100g。 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB5009.5食品安全国家标准食品中蛋白质的测定 GB5413.3食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中乳糖、蔗糖的测定 GB5413.5食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中脂肪的测定 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法 3原理 均质牛乳中甘油酯的羰基在5.7μm处（脂肪A)、碳氢基在3.5μm处（脂肪B)红外吸收测定脂肪； 肽键的胺基在6.5μm处红外吸收测定蛋白质；乳糖的羟基在9.6μm处红外吸收测定乳糖。以上3个 测定值加0.7%维生素及无机盐在牛乳红外光谱仪内计算总固体含量。 4试剂 除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。 4.1专用防腐剂。 4.3叠氮化钠(NaN）。 5仪器设备 5.1恒温水浴锅：（45±1)℃。 5.2牛乳红外光谱仪。 b) 仪器稳定性日检查，按附录B的规定执行。 5.3采样管。 6试样制备 6.1样品从采集到测定，常温下放置不应超过2h，2℃～6℃条件下放置不应超过72h。如超过上述时 间，需加入防腐剂。 6.2常用防腐剂使用方法如下： a）专用防腐剂，按使用说明加入，充分溶解，摇匀： b）重铬酸钾（4.2）：在试样（6.1)中浓度0.1g/100mL.此样品在室温下可保存2d；在2℃～6℃条 NY/T2659—2014 件下可保存5d； c） 叠氮化钠（4.3）：在试样（6.1)中浓度0.03g/100mL，此样品在室温下可保存2d；在2℃～6℃ 条件下可保存5d。 7分析步骤 7.1使用恒温水浴锅（5.1)或等同设施，使试样测试前预热至（40士1)℃。且上下颠倒9次，水平振摇 6次。 7.2按牛乳红外光谱仪(5.2)操作说明书的规定进行测定。 8 结果表述 仪器计算结果，精确至小数点后2位，单位为质量分数（%）。 9精密度 9.1重复性条件下获得的2次独立测试结果的绝对差值不大于0.06%。 9.2再现性条件下测定值（不包括离群值）标准差不大于0.045%。 注：实验室间的再现性考察，仪器的校准应使用同一参比方法定值的同批次校准样品。 行业标准信息服务平台 2 NY/T2659—2014 附录A （规范性附录） 仪器测定准确度影响因子的控制 A.1测量线性 A.1.1线性范围 A.1.1.1脂肪线性范围质量分数宜为2.5%~5.0%，测高脂牛乳产地的牛乳红外光谱仪宜将上限提 到7.0%。 A.1.1.2蛋白质线性范围质量分数宜为2.5%～4.0%，测高蛋白质牛乳产地的牛乳红外光谱仪宜将 上限提到5.0%。 A.1.1.3乳糖线性范围质量分数宜为4.0%~6.0%。 A.1.2测定线性样品的制备 在以上线性范围内制备不同浓度的脂肪、蛋白质、乳糖样品各6个。配制的原料及比例见表A.1 所示。 表A.1原料及其配制比例 脂肪样品 蛋白质样品 乳糖样品 脂肪含量 蛋白质含量 乳糖含量6.0% 水 浓度，% 水 浓度，% 水 浓度，% 5.0%牛奶 4.0%脱脂乳 乳糖溶液 100 0 5.0 100 0 1.0 100 0 6.0 90 10 4. 5 92.5 7.5 3.7 93.3 6.7 5.6 80 20 4.0 85 15 3.4 86.7 13. 3 5.2 30 3. 5 77.5 22.5 3. 1 80 20 4.8 60 40 3. 0 70 30 2.8 73. 3 26.7 4. 4 66.7 50 50 2.5 62.5 37.5 2.5 33.3 4.0 A.1.3参比方法 A.1.3.1脂肪：按GB5413.3规定的方法进行测定。 A.1.3.2蛋白质：按GB5009.5规定的方法进行测定 A.1.3.3乳糖：按GB5413.5规定的方法进行测定。 A.1.4分析步骤 每个浓度样品按第7章规定的方法进行二次平行测定，结果达到重复性条件下的精密度要求，取算 术平均值，得到仪器测定值。 每个浓度样品按A.1.3规定的参比方法进行测定，得到参比方法测定值。 A.1.5结果计算 线性相关系数以计，数值以质量分数（%）表示，按式（A，1)计算。 Z(ri-r)(yi-y) (A.1) V(r,-) (y,-y)? 式中： 第i次仪器测定值，单位为质量分数（%）； 3 NY/T 2659—2014 仪器测定值的算术平均值，单位为质量分数（%）； J;——第i次参比方法测定值，单位为质量分数（%)； J一一参比方法测定值的算术平均值，单位为质量分数（%）。 计算结果保留4位有效数字。 A.1.6线性要求 线性相关系数t应不小于0.9990。 A.2样品池清洗效率 A.2.1测定样品池清洗效率的样品制备 以牛乳和水各10个为试样，成双相间排列：水、水，牛乳、牛乳、水、水. A.2.2分析步骤 按第7章规定的方法测定脂肪、蛋白质、乳糖的含量。 A.2.3结果计算 样品池清洗效率以E计，数值以质量分数（%）表示，按式（A.2)计算。 M-w E= X 100 (A.2) ZM,-ZW 式中： M, 成双牛乳样的第一个测定值，单位为质量分数（%）； W, 成双水样的第二个测定值，单位为质量分数（%）； Mz 成双牛乳样的第二个测定值，单位为质量分数（%）。 A.2.4样品池清洗效率的要求 样品池清洗效率E应在100%士1%范围内。 A.3校准有效性的确认 A.3.1初始校准的检查 A.3.1.1样品要求 用于检查的样品为牛乳，数量不小于6个，应同时满足以下条件： a）脂肪、蛋白质、乳糖的含量均在仪器测量线性范围内（A.1.1)； 信息服 b）体细胞含量不超过10°sc/mL； c）样品在感官上不应变质。 A.3.1.2分析步骤 同A.1.4。 A.3.1.3结果计算 以仪器测定值为横坐标，参比方法测定值为纵坐标y，作图。线性回归方程如式（A.3)。 y=ur+b. (A.3) 该线性回归方程的剩余标准差以S计，数值以质量分数（%）表示，按式（A.4)计算。 Ey,-(ar, +b)] : (A.4) S n [ 式中： 第次参比方法测定值，单位为质量分数（%）； yi 第i次仪器测定值，单位为质量分数（%）； ri 4 NY/T2659-2014 一测定次数。 n- A.3.1.4校准有效性的确认 剩余标准差S应不大于0.06%；否则.应重新校准。 A.3.2期间核查 A.3.2.1期间核查周期 仪器校准状态期间核查的周期为3个月。当发生下列情况之一时，应随时进行期间核查： a）参比方法修订； b）牛乳红外光谱仪的主要部件，包括样品池、均质器、光学部件等进行维修或更换； c）牛乳红外光谱仪稳定性日检查发生异常。 A.3.2.2分析步骤 选n个(≥6)试样，分析步骤同A.1.4。 A.3.2.3校准有效性的确认 期间核查结果应同时满足以下条件，否则应重新校准： a）n个（≥6)试样的仪器测定值和参比方法测定值之差的算术平均值不超过0.2/nl²； b）n个（≥6)试样的仪器测定值和参比方法测定值之差的标准差不超过0.1%。 行业标准信息服务平台 5