ICS 65.020.20 CCS B 05 黑 DB23 龙 江 省 地 方 标 准 DB23/T 3129—2022 欧石竹组培育苗技术规程 2022-03-03 发布 黑龙江省市场监督管理局 2022-04-02 实施 发 布 DB23/T 3129—2022 前 言 本文件依据 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第 1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规 定起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由黑龙江省农业农村厅提出。 本文件起草单位：东北农业大学。 本文件主要起草人：王金刚、张海珍、杨雅涵、钮志勇、乔坤、周爱民、龚束芳。 I DB23/T 3129—2022 欧石竹组培育苗技术规程 1 范围 本文件规定了欧石竹（Dianthus carthusianorum L.）组培育苗的环境与设备消毒、培养基配制、外 植体制备、培养条件、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养、炼苗、温室移栽与管理及生产档案。 本文件适用于欧石竹的组培育苗。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 8321（所有部分） 农药合理使用准则 LY/T 1882-2010 林木组织培养育苗技术规程 NY/T 1276 农药安全使用规范 总则 NY/T 2306-2013 花卉种苗组培快繁技术规程 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 环境与设备消毒 4.1 接种室消毒 接种室消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.6 进行。 4.2 培养室消毒 培养室消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.7 进行。 4.3 超净工作台消毒 超净工作台消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.5、8.6 进行。 4.4 接种器具消毒 接种器具消毒按 NY/T 2306-2013 中 8.4 进行。 5 培养基配制 5.1 母液配制 培养基母液配制按 NY/T 2306-2013 中 7.3 执行。 1 DB23/T XXXX—XXXX 5.2 培养基配制 5.2.1 培养基配方 培养基配制成分如下： a) 初代培养基：MS＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L，pH值5.8～6.0； b) 继代培养基：MS＋0.5 mg/L 6-BA＋1.5 mg/L 2,4-D＋0.1 mg/L NAA＋蔗糖30 g/L＋琼脂 8 g/L，pH值5.8～6.0； c) 壮苗培养基：1/2 MS＋1.0 mg/L IBA＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L，pH值5.8～6.0； d) 生根培养基：1/2 MS＋蔗糖30 g/L＋琼脂粉8 g/L，pH值5.8～6.0。 5.2.2 培养基配制方法 培养基配制方法按 NY/T 2306-2013 中 7.4 执行。 5.3 培养基灭菌及保存 培养基灭菌及保存方法按 LY/T 1882-2010 中 4.2 进行。 6 外植体制备 6.1 外植体选择 选取当年生的嫩茎作为外植体，宜晴天剪取。 6.2 外植体处理 取≥10 cm 的茎段，流水冲洗≦3 h，在超净工作台中，先用 75%乙醇溶液消毒 10 s 后，用无菌水 冲洗 3 次，加 2%次氯酸钠溶液消毒 5 min，再用无菌水冲洗 4～5 次，用滤纸吸干外植体表面水分。 7 培养条件 无菌培养室温度控制在21 ℃～25 ℃，相对空气湿度控制在60%～80%，光照强度为2000 Lux～3000 Lux，光照时间为12 h/d～14 h/d。 8 初代培养 将消毒后的外植体切成 1 cm～2 cm 的茎段，每段至少带有 1 个～2 个叶芽，将切好的外植体接种 到初代培养基中，培养 21 d～28 d。 9 继代培养 将分化的不定芽转接入继代培养基中，6 个/瓶～10 个/瓶，培养 28 d～35 d，分割新长出的不定 芽，可按需求重复继代。 10 壮苗培养 切取继代培养高度≥1.0 cm 的不定芽，转接至壮苗培养基中，6 个/瓶～8 个/瓶，培养 14 d～21 d。 2 DB23/T 3129—2022 11 生根培养 壮苗培养基中组培苗高度≥2.0 cm 时，将小苗转入生根培养基中 8 株/瓶～10 株/瓶。当小苗基部 长出健壮的≥3 条不定根，根长为 0.5 cm～2.0 cm 时，可进行炼苗。 12 炼苗 将生根培养组培苗转移到过渡培养间，半开瓶口1 d～2 d后，敞开瓶口炼苗2 d～3 d后可移栽。 13 温室移栽与管理 13.1 基质制备 将草炭土和蛭石按体积比为1:1混合，装入50 孔的穴盘中。栽植前用多菌灵可湿粉剂0.5 g/L溶液浇 透消毒24 h。农药使用应符合GB/T 8321和NY/T 1276的规定执行。 13.2 组培苗移栽 炼苗后取出幼苗, 用清水洗净根部培养基,将幼苗栽入淋透水的基质中，压实小苗周围的基质，浇 透水，覆70%遮阳网。 13.3 移栽苗管理 适时浇水，保持基质湿润；移栽5 d～7 d后，去掉遮阳网，浇1/2 MS营养液1次；温度控制在20 ℃～ 28 ℃，空气相对湿度60%～80%。 14 生产档案 应建立生产档案，内容包括：环境与设备消毒、培养基配制、外植体制备、 培养条件、初代培养、 继代培养、壮苗培养、生根培养、炼苗、温室移栽与管理等。 3