ICS 65.020.30 B 44 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T14926.29—2001 代替GB/T14926.29—1994 实验动物 多瘤病毒检测方法 Laboratory animalMethod for examination of polyoma virus (POLY) 2002-05-01实施 2001-08-29发布 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 2001 GB/T 14926. 29 前 創言 本标准是对GB/T11926.29—1991《实验动物 多瘤病毒检验方法的修订。对检测方法未作改 动，仅对原标的个别文字作了修。 本标准出中华人民共利国科学技术部提出并门口 本标准起草单位：中国实验动物学会。 本标准主要起草人：屈霞琴 本标准于1994年1月首次发布 I 中华人民共和国国家标准 实验动物 GB/T 14926.29—2001 多瘤病毒检测方法 代替GB/T14925.291994 Laboratary animalMethod for cxamination of polyoma virus (POLY) 1范围 本标准规定了小鼠多瘤病毒(POI,Y)的检测方法和试剂等。 本标准适川丁小鼠 POLY 的检测。 2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引而构成为本标准的条文。本标准出版时。所示版本均 为有效，所有标准都会被修订使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性， GB/T14926.50—2001实验动物酶联免疫吸附试验 GB/T14926.51—2001实验动物免疫酶试验 GB/T14926.52—2001实验动物免疫荧光试验 3原理 根据免疫学原理，采用 POT.Y抗原检测小鼠血清中POI,Y抗体。 4主要试剂和器材 4. 1 试剂: 4.1.1 EL1SA抗原 4.1.1.1特异性抗原 POIL.Y 接种小鼠胚(ME)或 3T3 细胞,加维持液培养 10~～14 d,当组胞病变达十++～十+++ 收获，冻融三次或超声波处理后，低速离心去除细胞碎片·上清液再经超速离心浓缩后制成ELISA抗 原. 4.1.1.2正常抗原 MF或3T3细胞冻融破碎后，经低速离心去除细胞碎片而获得的上清液。 4.1. 2抗原片:P(OI.Y接种 ME 细胞,培养 10~12 d.病变达++~+++时用胰酶消化分散,PBS 洗 涤，涂，室温十燥后，冷内酮周定10 min，一20℃保存。 4. 1. 3 阳性血清 POLY抗原免疫SPF小鼠所获得的抗血清。 4. 1. 4 阴性,血清 SPF 小鼠血清。 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局2001-08-29批准 2002-05-01实施 35